banner de página

Aceite esencial a granel

  • Aceite esencial de hoja de eucalipto natural puro de aromaterapia para el cuidado de la piel y el cuerpo.

    Aceite esencial de hoja de eucalipto natural puro de aromaterapia para el cuidado de la piel y el cuerpo.

    Método de extracción o procesamiento: destilado al vapor

    Destilación Extracción parte: hoja

    Origen del país: China

    Aplicación: Difusión/aromaterapia/masaje

    Vida útil: 3 años

    Servicio personalizado: etiqueta y caja personalizadas o según sus necesidades.

    Certificación: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

     

    El aceite de eucalipto reacciona con la mucosidad y la diluye, proporcionando un alivio inmediato de la dificultad para respirar y otros problemas respiratorios. Es tan potente que funciona como repelente de insectos. En aromaterapia, proporciona claridad mental. Sus beneficios terapéuticos se deben a sus propiedades antimicrobianas, antibacterianas, antisépticas, antiespasmódicas y antivirales. Úselo para tratar diversas afecciones de la piel y la salud. Contiene eucaliptol, también conocido como cineol. Este compuesto favorecerá su salud y bienestar general.

     

  • Aceite esencial de lavanda orgánico puro natural para el cuidado de la piel con aromaterapia.

    Aceite esencial de lavanda orgánico puro natural para el cuidado de la piel con aromaterapia.

    Método de extracción o procesamiento: Destilado al vapor

    Parte de extracción por destilación:Flor

    Origen del país: China

    Aplicación: Difusión/aromaterapia/masaje

    Vida útil: 3 años

    Servicio personalizado: etiqueta y caja personalizadas o según sus necesidades.

    Certificación: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

  • Aceite esencial de corteza de Magnolia officinalis 100 % puro y orgánico para el cuidado de la piel.

    Aceite esencial de corteza de Magnolia officinalis 100 % puro y orgánico para el cuidado de la piel.

    La fragancia de Hou Po es inmediatamente amarga y profundamente picante, y luego se abre gradualmente con una dulzura y calidez profundas y almibaradas.

    El Hou Po tiene afinidad con los elementos Tierra y Metal, donde su calor intenso actúa con fuerza para disminuir el Qi y secar la humedad. Debido a estas cualidades, se utiliza en la medicina china para aliviar el estancamiento y la acumulación de flema en el tracto digestivo, así como la tos y las sibilancias causadas por la obstrucción pulmonar.

    La Magnolia Officinials es un árbol caducifolio originario de las montañas y valles de Sichuan, Hubei y otras provincias de China. Su corteza, altamente aromática y utilizada en la medicina tradicional china, se extrae de los tallos, ramas y raíces. Se recolecta entre abril y junio. La corteza, gruesa y lisa, rica en aceite, presenta un color violáceo en el interior con un brillo cristalino.

    Los practicantes pueden considerar combinar Hou Po con aceite esencial Qing Pi como un complemento de nota alta en mezclas destinadas a romper acumulaciones.

  • Paquete personalizado OEM de aceite de rizoma de macrocefalia natural

    Paquete personalizado OEM de aceite de rizoma de macrocefalia natural

    Como agente quimioterapéutico eficiente, el 5-fluorouracilo (5-FU) se aplica ampliamente para el tratamiento de tumores malignos en el tracto gastrointestinal, cabeza, cuello, tórax y ovario. Además, el 5-FU es el fármaco de primera línea para el cáncer colorrectal en la clínica. El mecanismo de acción del 5-FU es bloquear la transformación del ácido nucleico de uracilo en ácido nucleico de timina en las células tumorales, lo que luego afecta la síntesis y reparación del ADN y el ARN para lograr su efecto citotóxico (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). Sin embargo, el 5-FU también produce diarrea inducida por quimioterapia (CID), una de las reacciones adversas más comunes que afecta a muchos pacientes (Filho et al., 2016). La incidencia de diarrea en pacientes tratados con 5-FU alcanzó el 50-80%, lo que afectó gravemente el progreso y la eficacia de la quimioterapia (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Por consiguiente, es fundamental encontrar un tratamiento eficaz para la DIC inducida por 5-FU.

    En la actualidad, se han incorporado al tratamiento clínico de la CID intervenciones no farmacológicas y farmacológicas. Estas incluyen una dieta equilibrada y la suplementación con sal, azúcar y otros nutrientes. Medicamentos como la loperamida y la octreótida se utilizan habitualmente en la terapia antidiarreica de la CID (Benson et al., 2004). Además, en diversos países también se han adoptado métodos etnomédicos para tratar la CID con terapias únicas. La medicina tradicional china (MTC) es una etnomedicina típica que se ha practicado durante más de 2000 años en países del este asiático, como China, Japón y Corea (Qi et al., 2010). La MTC sostiene que los fármacos quimioterapéuticos desencadenarían el consumo de Qi, la deficiencia del bazo, la desarmonía estomacal y la humedad endofítica, lo que provocaría una disfunción conductiva intestinal. Según la teoría de la MTC, la estrategia de tratamiento de la CID debería basarse principalmente en la suplementación de Qi y el fortalecimiento del bazo (Wang et al., 1994).

    Las raíces secas deAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) yPanax ginsengCA Mey. (PG) son las hierbas medicinales típicas de la MTC con los mismos efectos de suplementar el Qi y fortalecer el bazo (Li et al., 2014). AM y PG se utilizan generalmente como pareja de hierbas (la forma más simple de compatibilidad herbal china) con los efectos de suplementar el Qi y fortalecer el bazo para tratar la diarrea. Por ejemplo, AM y PG se documentaron en fórmulas antidiarreicas clásicas como Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang deTaiping Huimin Heji Ju Fang(dinastía Song, China) y Bu Zhong Yi Qi Tang dePi Wei Lun(Dinastía Yuan, China) (Fig. 1). Diversos estudios previos han reportado que las tres fórmulas poseen la capacidad de aliviar la CID (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Además, nuestro estudio previo demostró que la Cápsula Shenzhu, que solo contiene AM y PG, tiene efectos potenciales en el tratamiento de la diarrea, la colitis (síndrome de Xiexie) y otras enfermedades gastrointestinales (Feng et al., 2018). Sin embargo, ningún estudio ha analizado el efecto y el mecanismo de la AM y la PG en el tratamiento de la CID, ya sea en combinación o por separado.

    Actualmente, la microbiota intestinal se considera un factor potencial para comprender el mecanismo terapéutico de la MTC (Feng et al., 2019). Estudios modernos indican que la microbiota intestinal desempeña un papel crucial en el mantenimiento de la homeostasis intestinal. Una microbiota intestinal sana contribuye a la protección de la mucosa intestinal, el metabolismo, la homeostasis y la respuesta inmunitaria, y la supresión de patógenos (Thursby y Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Una microbiota intestinal alterada perjudica las funciones fisiológicas e inmunitarias del cuerpo humano, directa o indirectamente, induciendo reacciones secundarias como la diarrea (Patel et al., 2016; Zhao y Shen, 2010). Diversas investigaciones han demostrado que el 5-FU modificó notablemente la estructura de la microbiota intestinal en ratones con diarrea (Li et al., 2017). Por lo tanto, los efectos de la mañana y la tarde sobre la diarrea inducida por 5-FU podrían estar mediados por la microbiota intestinal. Sin embargo, aún se desconoce si la AM y la PG solas y en combinación podrían prevenir la diarrea inducida por 5-FU al modular la microbiota intestinal.

    Para investigar los efectos antidiarreicos y el mecanismo subyacente de la AM y la PG, utilizamos 5-FU para simular un modelo diarreico en ratones. En este estudio, nos centramos en los posibles efectos de la administración única y combinada (AP) deAtractylodes macrocephalaaceite esencial (AMO) yPanax ginsengsaponinas totales (PGS), los componentes activos extraídos respectivamente de AM y PG, sobre la diarrea, la patología intestinal y la estructura microbiana después de la quimioterapia con 5-FU.

  • Aceite esencial de Eucommiae Foliuml 100% puro y natural para el cuidado de la piel

    Aceite esencial de Eucommiae Foliuml 100% puro y natural para el cuidado de la piel

    Eucommia ulmoides(EU) (comúnmente llamado “Du Zhong” en idioma chino) pertenece a la familia de Eucommiaceae, un género de árbol pequeño nativo de China central [1Esta planta se cultiva ampliamente en China debido a su importancia medicinal. Se han aislado alrededor de 112 compuestos de la UE, entre ellos lignanos, iridoides, fenólicos, esteroides y otros. Se han demostrado propiedades medicinales en la preparación de hierbas complementarias de esta planta (como el delicioso té). La hoja de UE tiene mayor actividad en la corteza, la flor y el fruto.2,3Se ha informado que las hojas de EU mejoran la fuerza de los huesos y los músculos del cuerpo.4], lo que conduce a la longevidad y promueve la fertilidad en los seres humanos [5Se ha informado que la deliciosa fórmula de té elaborada con hojas de eucalipto reduce la grasa y mejora el metabolismo energético. Se ha informado que los compuestos flavonoides (como la rutina, el ácido clorogénico, el ácido ferúlico y el ácido cafeico) exhiben actividad antioxidante en las hojas de eucalipto.6].

    Si bien existe suficiente literatura sobre las propiedades fitoquímicas del apio de campo, existen pocos estudios sobre las propiedades farmacológicas de los diversos compuestos extraídos de sus cortezas, semillas, tallos y hojas. Este artículo de revisión brindará información detallada sobre los diferentes compuestos extraídos de sus diversas partes (corteza, semillas, tallo y hojas) y sus posibles usos en propiedades beneficiosas para la salud, con base en evidencia científica, proporcionando así un material de referencia para la aplicación del apio de campo.

  • Aceite puro natural de Houttuynia cordata Aceite de Houttuynia Cordata Aceite de Lchthammolum

    Aceite puro natural de Houttuynia cordata Aceite de Houttuynia Cordata Aceite de Lchthammolum

    En la mayoría de los países en desarrollo, entre el 70 y el 95% de la población depende de medicinas tradicionales para la atención primaria de salud y, de éstos, el 85% de las personas utilizan plantas o sus extractos como sustancia activa.1La búsqueda de nuevos compuestos biológicamente activos a partir de plantas suele depender de la información étnica y popular específica obtenida de los médicos locales y aún se considera una fuente importante para el descubrimiento de fármacos. En la India, aproximadamente 2000 fármacos son de origen vegetal.2] En vista del interés generalizado en el uso de plantas medicinales, la presente revisión sobreHouttuynia cordataThunb. proporciona información actualizada con referencia a estudios botánicos, comerciales, etnofarmacológicos, fitoquímicos y farmacológicos que aparecen en la literatura.H. cordataThunb. pertenece a la familiaSaururáceasSe la conoce comúnmente como cola de lagarto china. Es una hierba perenne con rizoma estolonífero que presenta dos quimiotipos distintos.3,4] El quimiotipo chino de la especie se encuentra en condiciones silvestres y semisilvestres en el noreste de la India de abril a septiembre.[5,6,7]H. cordataEstá disponible en la India, especialmente en el valle de Brahmaputra de Assam y es utilizado tradicionalmente por varias tribus de Assam en forma de verdura y también con diversos fines medicinales.

  • Fabricante de aceite de Arctium lappa 100 % puro: aceite de Arctium lappa de lima natural con certificados de garantía de calidad.

    Fabricante de aceite de Arctium lappa 100 % puro: aceite de Arctium lappa de lima natural con certificados de garantía de calidad.

    Beneficios para la salud

    La raíz de bardana se consume a menudo, pero también se puede secar y preparar en infusión. Funciona bien como fuente de inulina, un...prebióticofibra que facilita la digestión y mejora la salud intestinal. Además, esta raíz contiene flavonoides (nutrientes vegetales).fitoquímicosy antioxidantes que se sabe que tienen beneficios para la salud.

    Además, la raíz de bardana puede proporcionar otros beneficios como:

    Reducir la inflamación crónica

    La raíz de bardana contiene una serie de antioxidantes, como quercetina, ácidos fenólicos y luteolina, que pueden ayudar a proteger sus células deradicales libresEstos antioxidantes ayudan a reducir la inflamación en todo el cuerpo.

    Riesgos para la salud

    La raíz de bardana se considera segura para comer o beber en té. Sin embargo, esta planta se parece mucho a la belladona, que es tóxica. Se recomienda comprarla solo en vendedores de confianza y no recolectarla por cuenta propia. Además, existe poca información sobre sus efectos en niños o mujeres embarazadas. Consulte a su médico antes de usarla en niños o si está embarazada.

    A continuación se presentan algunos otros posibles riesgos para la salud que se deben tener en cuenta si se utiliza raíz de bardana:

    Aumento de la deshidratación

    La raíz de bardana actúa como un diurético natural, lo que puede causar deshidratación. Si toma diuréticos u otros diuréticos, no debe tomar raíz de bardana. Si toma estos medicamentos, es importante tener en cuenta otros fármacos, hierbas e ingredientes que puedan causar deshidratación.

    Reacción alérgica

    Si usted es sensible o tiene antecedentes de reacciones alérgicas a las margaritas, la ambrosía o los crisantemos, corre un mayor riesgo de sufrir una reacción alérgica a la raíz de bardana.

     

  • Precio al por mayor a granel 100% puro AsariRadix Et Rhizoma aceite Relax Aromaterapia Eucalyptus globulus

    Precio al por mayor a granel 100% puro AsariRadix Et Rhizoma aceite Relax Aromaterapia Eucalyptus globulus

    Estudios en animales e in vitro han investigado los posibles efectos antifúngicos, antiinflamatorios y cardiovasculares del sasafrás y sus componentes. Sin embargo, faltan ensayos clínicos, y el sasafrás no se considera seguro para su uso. El safrol, principal componente de la corteza y el aceite de la raíz de sasafrás, ha sido prohibido por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA), incluso para su uso como saborizante o fragancia, y no debe usarse ni interna ni externamente, ya que es potencialmente cancerígeno. El safrol se ha utilizado en la producción ilegal de 3,4-metilendioximetanfetamina (MDMA), también conocida como "éxtasis" o "Molly", y la venta de safrol y aceite de sasafrás está supervisada por la Administración para el Control de Drogas de los Estados Unidos (DEA).

  • Aceite esencial Stellariae Radix 100% puro (nuevo), aromaterapia relajante, eucalipto globulus.

    Aceite esencial Stellariae Radix 100% puro (nuevo), aromaterapia relajante, eucalipto globulus.

    La Farmacopea China (edición 2020) requiere que el extracto de metanol de YCH no sea inferior al 20,0 % [2], sin otros indicadores de evaluación de calidad especificados. Los resultados de este estudio muestran que el contenido de los extractos metanólicos de las muestras silvestres y cultivadas cumplió con el estándar de la farmacopea, y no se observaron diferencias significativas entre ellas. Por lo tanto, no se observó una diferencia aparente de calidad entre las muestras silvestres y cultivadas, según dicho índice. Sin embargo, el contenido de esteroles y flavonoides totales en las muestras silvestres fue significativamente mayor que en las cultivadas. Un análisis metabolómico posterior reveló una abundante diversidad de metabolitos entre las muestras silvestres y cultivadas. Además, se descartaron 97 metabolitos significativamente diferentes, que se enumeran en laTabla suplementaria S2Entre estos metabolitos significativamente diferentes se encuentran el β-sitosterol (ID: M397T42) y los derivados de quercetina (M447T204_2), que se han descrito como principios activos. Componentes no descritos previamente, como la trigonelina (M138T291_2), la betaína (M118T277_2), la fustina (M269T36), la rotenona (M241T189), la arctiína (M557T165) y el ácido logánico (M399T284_2), también se incluyeron entre los metabolitos diferenciales. Estos componentes desempeñan diversas funciones en la antioxidante, la antiinflamatoria, la eliminación de radicales libres, la anticancerígena y el tratamiento de la aterosclerosis, por lo que podrían constituir nuevos componentes activos en el YCH. El contenido de los principios activos determina la eficacia y la calidad de los materiales medicinales.7En resumen, el extracto metanólico como único índice de evaluación de la calidad del YCH presenta algunas limitaciones, y es necesario explorar más a fondo marcadores de calidad más específicos. Se observaron diferencias significativas en el contenido total de esteroles, flavonoides y otros metabolitos diferenciales entre el YCH silvestre y el cultivado; por lo tanto, es posible que existieran diferencias de calidad entre ellos. Al mismo tiempo, los posibles ingredientes activos del YCH recientemente descubiertos podrían constituir un importante valor de referencia para el estudio de su base funcional y el desarrollo futuro de sus recursos.

    La importancia de los materiales medicinales genuinos ha sido reconocida desde hace mucho tiempo en la región de origen específica para producir medicinas herbales chinas de excelente calidad.8La alta calidad es un atributo esencial de los materiales medicinales genuinos, y el hábitat es un factor importante que afecta su calidad. Desde que el YCH comenzó a usarse como medicina, ha estado dominado por el YCH silvestre. Tras la exitosa introducción y domesticación del YCH en Ningxia en la década de 1980, la fuente de materiales medicinales de Yinchaihu pasó gradualmente del YCH silvestre al cultivado. Según una investigación previa sobre las fuentes de YCH [9] y la investigación de campo de nuestro grupo de investigación, existen diferencias significativas en las áreas de distribución de los materiales medicinales cultivados y silvestres. El YCH silvestre se distribuye principalmente en la Región Autónoma Hui de Ningxia de la Provincia de Shaanxi, adyacente a la zona árida de Mongolia Interior y Ningxia central. En particular, la estepa desértica en estas áreas es el hábitat más adecuado para el crecimiento del YCH. En contraste, el YCH cultivado se distribuye principalmente al sur del área de distribución silvestre, como el Condado de Tongxin (Cultivado I) y sus alrededores, que se ha convertido en la mayor base de cultivo y producción en China, y el Condado de Pengyang (Cultivado II), que se encuentra en una zona más meridional y es otra área productora de YCH cultivado. Además, los hábitats de las dos áreas cultivadas mencionadas anteriormente no son estepas desérticas. Por lo tanto, además del modo de producción, también existen diferencias significativas en el hábitat del YCH silvestre y cultivado. El hábitat es un factor importante que afecta la calidad de los materiales medicinales herbales. Los diferentes hábitats afectarán la formación y acumulación de metabolitos secundarios en las plantas, lo que afectará la calidad de los productos medicinales.10,11]. Por lo tanto, las diferencias significativas en el contenido de flavonoides totales y esteroles totales y la expresión de los 53 metabolitos que encontramos en este estudio podrían ser el resultado del manejo del campo y de las diferencias de hábitat.
    Una de las principales maneras en que el medio ambiente influye en la calidad de los materiales medicinales es ejerciendo estrés sobre las plantas de origen. El estrés ambiental moderado tiende a estimular la acumulación de metabolitos secundarios.12,13]. La hipótesis del equilibrio crecimiento/diferenciación establece que, cuando los nutrientes están en cantidad suficiente, las plantas crecen principalmente, mientras que cuando los nutrientes son deficientes, las plantas se diferencian principalmente y producen más metabolitos secundarios [14]. El estrés por sequía causado por la deficiencia de agua es el principal estrés ambiental que enfrentan las plantas en zonas áridas. En este estudio, la condición hídrica del YCH cultivado es más abundante, con niveles de precipitación anual significativamente más altos que los del YCH silvestre (el suministro de agua para Cultivado I fue aproximadamente el doble que el Silvestre; Cultivado II fue aproximadamente 3,5 veces mayor que el Silvestre). Además, el suelo en el entorno silvestre es arenoso, pero el suelo en las tierras de cultivo es arcilloso. En comparación con la arcilla, el suelo arenoso tiene una capacidad de retención de agua pobre y es más probable que agrave el estrés por sequía. Al mismo tiempo, el proceso de cultivo a menudo fue acompañado por riego, por lo que el grado de estrés por sequía fue bajo. El YCH silvestre crece en hábitats áridos naturales severos y, por lo tanto, puede sufrir un estrés por sequía más grave.
    La osmorregulación es un mecanismo fisiológico importante mediante el cual las plantas afrontan el estrés por sequía, y los alcaloides son importantes reguladores osmóticos en las plantas superiores [15Las betaínas son compuestos alcaloides de amonio cuaternario solubles en agua que pueden actuar como osmoprotectores. El estrés hídrico puede reducir el potencial osmótico de las células, mientras que los osmoprotectores preservan y mantienen la estructura e integridad de las macromoléculas biológicas y alivian eficazmente el daño causado por el estrés hídrico a las plantas.16]. Por ejemplo, bajo estrés por sequía, el contenido de betaína de la remolacha azucarera y de Lycium barbarum aumentó significativamente [17,18La trigonelina es un regulador del crecimiento celular y, bajo estrés hídrico, puede prolongar la duración del ciclo celular, inhibir el crecimiento celular y provocar la reducción del volumen celular. El aumento relativo de la concentración de solutos en la célula permite a la planta lograr la regulación osmótica y mejorar su capacidad para resistir el estrés hídrico.19]. JIA X [20] descubrieron que, con un aumento del estrés hídrico, el Astragalus membranaceus (una fuente de la medicina tradicional china) producía más trigonelina, la cual regula el potencial osmótico y mejora la capacidad de resistencia al estrés hídrico. También se ha demostrado que los flavonoides desempeñan un papel importante en la resistencia de las plantas al estrés hídrico.21,22Numerosos estudios han confirmado que el estrés hídrico moderado favoreció la acumulación de flavonoides. Lang Duo-Yong et al. [23] compararon los efectos del estrés hídrico en el YCH mediante el control de la capacidad de retención de agua en el campo. Se observó que el estrés hídrico inhibió el crecimiento de las raíces hasta cierto punto, pero en condiciones de estrés hídrico moderado y severo (40 % de la capacidad de retención de agua en el campo), el contenido total de flavonoides en el YCH aumentó. Mientras tanto, bajo estrés hídrico, los fitoesteroles pueden regular la fluidez y la permeabilidad de las membranas celulares, inhibir la pérdida de agua y mejorar la resistencia al estrés.24,25]. Por lo tanto, la mayor acumulación de flavonoides totales, esteroles totales, betaína, trigonelina y otros metabolitos secundarios en el YCH silvestre podría estar relacionada con el estrés por sequía de alta intensidad.
    En este estudio, se realizó un análisis de enriquecimiento de la vía KEGG en los metabolitos que mostraron diferencias significativas entre el YCH silvestre y el cultivado. Los metabolitos enriquecidos incluyeron aquellos involucrados en las vías metabólicas del ascorbato y el aldarato, la biosíntesis de aminoacil-ARNt, el metabolismo de la histidina y el metabolismo de la beta-alanina. Estas vías metabólicas están estrechamente relacionadas con los mecanismos de resistencia al estrés de las plantas. Entre ellas, el metabolismo del ascorbato desempeña un papel importante en la producción de antioxidantes, el metabolismo del carbono y el nitrógeno, la resistencia al estrés y otras funciones fisiológicas de las plantas.26]; La biosíntesis de aminoacil-ARNt es una vía importante para la formación de proteínas [27,28], que participa en la síntesis de proteínas resistentes al estrés. Tanto la vía de la histidina como la de la β-alanina pueden mejorar la tolerancia de las plantas al estrés ambiental.29,30]. Esto indica además que las diferencias en los metabolitos entre el YCH silvestre y el cultivado estaban estrechamente relacionadas con los procesos de resistencia al estrés.
    El suelo es la base material para el crecimiento y desarrollo de las plantas medicinales. El nitrógeno (N), el fósforo (P) y el potasio (K) del suelo son nutrientes importantes para el crecimiento y desarrollo de las plantas. La materia orgánica del suelo también contiene N, P, K, Zn, Ca, Mg y otros macroelementos y oligoelementos necesarios para las plantas medicinales. El exceso o la deficiencia de nutrientes, o las proporciones desequilibradas de estos, afectarán el crecimiento, el desarrollo y la calidad de los materiales medicinales, ya que cada planta tiene diferentes necesidades nutricionales.31,32,33Por ejemplo, un bajo estrés de N promovió la síntesis de alcaloides en Isatis indigotica y benefició la acumulación de flavonoides en plantas como Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge y Dichondra repens Forst. Por el contrario, un exceso de N inhibió la acumulación de flavonoides en especies como Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis y Ginkgo biloba, y afectó la calidad de los materiales medicinales.34]. La aplicación de fertilizante P fue efectiva para aumentar el contenido de ácido glicirrícico y dihidroacetona en el regaliz Ural [35]. Cuando la cantidad de aplicación superó los 0,12 kg·m−2, el contenido total de flavonoides en Tussilago farfara disminuyó [36]. La aplicación de un fertilizante P tuvo un efecto negativo en el contenido de polisacáridos en el rhizoma polygonati de la medicina tradicional china [37], pero un fertilizante K fue efectivo para aumentar su contenido de saponinas [38]. La aplicación de 450 kg·hm−2 de fertilizante K fue la mejor para el crecimiento y la acumulación de saponina en Panax notoginseng de dos años [39]. Bajo la relación N:P:K = 2:2:1, las cantidades totales de extracto hidrotermal, harpagida y harpagosido fueron las más altas [40La alta proporción de N, P y K favoreció el crecimiento de Pogostemon cablin y aumentó el contenido de aceite volátil. Una proporción baja de N, P y K incrementó el contenido de los principales componentes activos del aceite de hoja de tallo de Pogostemon cablin.41El YCH es una planta tolerante a suelos áridos y podría tener requerimientos específicos de nutrientes como N, P y K. En este estudio, en comparación con el YCH cultivado, el suelo de las plantas silvestres de YCH fue relativamente árido: el contenido de materia orgánica, N total, P total y K total fue aproximadamente 1/10, 1/2, 1/3 y 1/3 del de las plantas cultivadas, respectivamente. Por lo tanto, las diferencias en los nutrientes del suelo podrían ser otra razón para las diferencias entre los metabolitos detectados en el YCH cultivado y el silvestre. Weibao Ma et al. [42Se descubrió que la aplicación de cierta cantidad de fertilizantes nitrogenados y fosfatados mejoró significativamente el rendimiento y la calidad de las semillas. Sin embargo, el efecto de los nutrientes en la calidad del YCH no está claro, y se requieren más estudios sobre las medidas de fertilización para mejorar la calidad de los materiales medicinales.
    Las medicinas herbales chinas tienen las características de “Los hábitats favorables promueven el rendimiento y los hábitats desfavorables mejoran la calidad” [43En el proceso de transición gradual del YCH silvestre al cultivado, el hábitat de las plantas cambió de la estepa desértica árida y estéril a tierras fértiles con mayor abundancia de agua. El hábitat del YCH cultivado es superior y su rendimiento es mayor, lo que contribuye a satisfacer la demanda del mercado. Sin embargo, este hábitat superior provocó cambios significativos en los metabolitos del YCH; se requiere mayor investigación para determinar si esto contribuye a mejorar la calidad del YCH y cómo lograr una producción de alta calidad mediante medidas de cultivo con base científica.
    El cultivo de hábitat simulado es un método para simular el hábitat y las condiciones ambientales de las plantas medicinales silvestres, basado en el conocimiento de la adaptación a largo plazo de las plantas a estreses ambientales específicos [43]. Al simular diversos factores ambientales que afectan a las plantas silvestres, especialmente el hábitat original de las plantas utilizadas como fuentes de materiales medicinales auténticos, el enfoque utiliza el diseño científico y la intervención humana innovadora para equilibrar el crecimiento y el metabolismo secundario de las plantas medicinales chinas [43]. Los métodos buscan lograr las condiciones óptimas para el desarrollo de materiales medicinales de alta calidad. El cultivo en hábitat simulado debería proporcionar una forma eficaz de producir YCH de alta calidad, incluso cuando la base farmacodinámica, los marcadores de calidad y los mecanismos de respuesta a factores ambientales no están claros. Por consiguiente, sugerimos que el diseño científico y las medidas de gestión de campo para el cultivo y la producción de YCH se implementen considerando las características ambientales del YCH silvestre, como las condiciones de suelo árido, estéril y arenoso. Al mismo tiempo, se espera que los investigadores realicen investigaciones más profundas sobre la base funcional del material y los marcadores de calidad del YCH. Estos estudios pueden proporcionar criterios de evaluación más eficaces para el YCH y promover la producción de alta calidad y el desarrollo sostenible de la industria.
  • Aceite de Fructus Amomi Herbal Difusores de masaje naturales 1 kg a granel Aceite esencial de Amomum villosum

    Aceite de Fructus Amomi Herbal Difusores de masaje naturales 1 kg a granel Aceite esencial de Amomum villosum

    La familia Zingiberaceae ha atraído cada vez más atención en la investigación alelopática debido a la riqueza de sus aceites volátiles y la aromaticidad de sus especies. Investigaciones previas habían demostrado que las sustancias químicas de la Curcuma zedoaria (zedoaria) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt y RMSm. [41] y Zingiber officinale Rosc.[42] de la familia del jengibre tienen efectos alelopáticos en la germinación de semillas y el crecimiento de plántulas de maíz, lechuga y tomate. Nuestro estudio actual es el primer informe sobre la actividad alelopática de volátiles de tallos, hojas y frutos jóvenes de A. villosum (un miembro de la familia Zingiberaceae). El rendimiento de aceite de tallos, hojas y frutos jóvenes fue del 0,15 %, 0,40 % y 0,50 %, respectivamente, lo que indica que los frutos produjeron una mayor cantidad de aceites volátiles que los tallos y las hojas. Los principales componentes de los aceites volátiles de los tallos fueron β-pineno, β-felandreno y α-pineno, un patrón similar al de los principales compuestos químicos del aceite de hoja, β-pineno y α-pineno (hidrocarburos monoterpénicos). Por otro lado, el aceite de los frutos jóvenes fue rico en acetato de bornilo y alcanfor (monoterpenos oxigenados). Los resultados fueron respaldados por los hallazgos de Do N Dai [30,32] y Hui Ao [31] quienes habían identificado los aceites de diferentes órganos de A. villosum.

    Se han publicado varios informes sobre la actividad inhibidora del crecimiento vegetal de estos compuestos principales en otras especies. Shalinder Kaur descubrió que el α-pineno del eucalipto suprimió significativamente la longitud de la raíz y la altura de los brotes de Amaranthus viridis L. a una concentración de 1,0 μL [43], y otro estudio mostró que el α-pineno inhibió el crecimiento temprano de las raíces y causó daño oxidativo en el tejido radicular a través del aumento de la generación de especies reactivas de oxígeno [44]. Algunos informes han argumentado que el β-pineno inhibió la germinación y el crecimiento de las plántulas de malezas de prueba en una respuesta dependiente de la dosis al alterar la integridad de la membrana [45], alterando la bioquímica de la planta y mejorando las actividades de las peroxidasas y polifenol oxidasas [46]. El β-felandreno exhibió una inhibición máxima de la germinación y el crecimiento de Vigna unguiculata (L.) Walp a una concentración de 600 ppm [47], mientras que, a una concentración de 250 mg/m3, el alcanfor suprimió el crecimiento de la radícula y los brotes de Lepidium sativum L. [48Sin embargo, la investigación que reporta el efecto alelopático del acetato de bornilo es escasa. En nuestro estudio, los efectos alelopáticos del β-pineno, el acetato de bornilo y el alcanfor sobre la longitud de la raíz fueron menores que los de los aceites volátiles, excepto el α-pineno. Por otro lado, el aceite de hoja, rico en α-pineno, también fue más fitotóxico que los aceites volátiles correspondientes de los tallos y frutos de A. villosum. Ambos hallazgos indican que el α-pineno podría ser la sustancia química clave para la alelopatía en esta especie. Al mismo tiempo, los resultados también implicaron que algunos compuestos en el aceite del fruto que no eran abundantes podrían contribuir a la producción del efecto fitotóxico, un hallazgo que requiere mayor investigación.
    En condiciones normales, el efecto alelopático de los aleloquímicos es específico de cada especie. Jiang et al. descubrieron que el aceite esencial producido por Artemisia sieversiana ejerció un efecto más potente sobre Amaranthus retroflexus L. que sobre Medicago sativa L., Poa annua L. y Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng.49En otro estudio, el aceite volátil de Lavandula angustifolia Mill. produjo diferentes grados de efectos fitotóxicos en distintas especies vegetales. Lolium multiflorum Lam. fue la especie aceptora más sensible, inhibiendo el crecimiento del hipocótilo y la radícula en un 87,8 % y un 76,7 %, respectivamente, con una dosis de 1 μL/mL de aceite. Sin embargo, el crecimiento del hipocótilo en plántulas de pepino apenas se vio afectado.20]. Nuestros resultados también mostraron que hubo una diferencia en la sensibilidad a los volátiles de A. villosum entre L. sativa y L. perenne.
    Los compuestos volátiles y los aceites esenciales de una misma especie pueden variar cuantitativa o cualitativamente debido a las condiciones de crecimiento, las partes de la planta y los métodos de detección. Por ejemplo, un informe demostró que el piranoide (10,3 %) y el β-cariofileno (6,6 %) fueron los principales compuestos volátiles emitidos por las hojas de Sambucus nigra, mientras que el benzaldehído (17,8 %), el α-bulneseno (16,6 %) y el tetracosano (11,5 %) fueron abundantes en los aceites extraídos de las hojas.50En nuestro estudio, los compuestos volátiles liberados por los materiales vegetales frescos tuvieron efectos alelopáticos más intensos en las plantas de prueba que los aceites volátiles extraídos. Las diferencias en la respuesta se relacionaron estrechamente con las diferencias en los aleloquímicos presentes en ambas preparaciones. Las diferencias exactas entre los compuestos volátiles y los aceites deben investigarse con mayor profundidad en experimentos posteriores.
    Las diferencias en la diversidad microbiana y la estructura de la comunidad microbiana en muestras de suelo a las que se habían añadido aceites volátiles se relacionaron con la competencia entre microorganismos, así como con los efectos tóxicos y la duración de los aceites volátiles en el suelo. Vokou y Liotiri [51] encontraron que la aplicación respectiva de cuatro aceites esenciales (0.1 mL) al suelo cultivado (150 g) activó la respiración de las muestras de suelo; incluso los aceites difirieron en su composición química, lo que sugiere que los aceites vegetales son utilizados como fuente de carbono y energía por los microorganismos presentes en el suelo. Los datos obtenidos del estudio actual confirmaron que los aceites de la planta completa de A. villosum contribuyeron al aumento evidente en el número de especies de hongos del suelo al decimocuarto día después de la adición del aceite, lo que indica que el aceite puede proporcionar la fuente de carbono para más hongos del suelo. Otro estudio reportó un hallazgo: los microorganismos del suelo recuperaron su función y biomasa iniciales después de un período temporal de variación inducido por la adición de aceite de Thymbra capitata L. (Cav), pero el aceite en la dosis más alta (0.93 µL de aceite por gramo de suelo) no permitió que los microorganismos del suelo recuperaran la funcionalidad inicial [52En el presente estudio, con base en el análisis microbiológico del suelo tras ser tratado con diferentes días y concentraciones, especulamos que la comunidad bacteriana del suelo se recuperaría después de más días. Por el contrario, la microbiota fúngica no puede volver a su estado original. Los siguientes resultados confirman esta hipótesis: el efecto distintivo de la alta concentración de aceite en la composición del microbioma fúngico del suelo se reveló mediante el análisis de coordenadas principales (PCoA), y las presentaciones del mapa de calor confirmaron nuevamente que la composición de la comunidad fúngica del suelo tratado con 3,0 mg/mL de aceite (es decir, 0,375 mg de aceite por gramo de suelo) a nivel de género difería considerablemente de los otros tratamientos. Actualmente, la investigación sobre los efectos de la adición de hidrocarburos monoterpénicos o monoterpenos oxigenados en la diversidad microbiana del suelo y la estructura de la comunidad es aún escasa. Algunos estudios informaron que el α-pineno aumentó la actividad microbiana del suelo y la abundancia relativa de Methylophilaceae (un grupo de metilotrofos, Proteobacteria) en condiciones de bajo contenido de humedad, desempeñando un papel importante como fuente de carbono en suelos más secos [53]. De manera similar, el aceite volátil de toda la planta de A. villosum, que contiene 15,03% de α-pineno (Tabla suplementaria S1), obviamente aumentó la abundancia relativa de Proteobacteria a 1,5 mg/mL y 3,0 mg/mL, lo que sugirió que el α-pineno posiblemente actúe como una de las fuentes de carbono para los microorganismos del suelo.
    Los compuestos volátiles producidos por diferentes órganos de A. villosum tuvieron diversos grados de efectos alelopáticos en L. sativa y L. perenne, lo cual estuvo estrechamente relacionado con los componentes químicos que contenían las partes de la planta de A. villosum. Si bien se confirmó la composición química del aceite volátil, se desconocen los compuestos volátiles liberados por A. villosum a temperatura ambiente, lo cual requiere mayor investigación. Además, el efecto sinérgico entre diferentes aleloquímicos también es digno de consideración. En términos de microorganismos del suelo, para explorar el efecto del aceite volátil en los microorganismos del suelo de manera integral, aún necesitamos realizar investigaciones más profundas: extender el tiempo de tratamiento del aceite volátil y discernir variaciones en la composición química del aceite volátil en el suelo en diferentes días.
  • Aceite puro de Artemisia capillaris para la fabricación de velas y jabón. Aceite esencial para difusores de quemador de caña.

    Aceite puro de Artemisia capillaris para la fabricación de velas y jabón. Aceite esencial para difusores de quemador de caña.

    Diseño de modelo de roedor

    Los animales se dividieron aleatoriamente en cinco grupos de quince ratones cada uno. Los ratones del grupo control y del grupo modelo recibieron alimentación por sonda.aceite de sésamoDurante 6 días. Los ratones del grupo control positivo recibieron por sonda nasogástrica tabletas de bifendato (BT, 10 mg/kg) durante 6 días. Los grupos experimentales recibieron 100 mg/kg y 50 mg/kg de AEO disuelto en aceite de sésamo durante 6 días. El día 6, el grupo control recibió aceite de sésamo, y todos los demás grupos recibieron una dosis única de CCl₄ al 0,2 % en aceite de sésamo (10 ml/kg).inyección intraperitonealLuego, los ratones fueron puestos en ayunas sin agua y se recogieron muestras de sangre de los vasos retrobulbares; la sangre recolectada se centrifugó a 3000 ×gdurante 10 minutos para separar el suero.Luxación cervicalSe realizó inmediatamente después de la extracción de sangre y se extrajeron rápidamente muestras de hígado. Una parte de la muestra de hígado se almacenó inmediatamente a -20 °C hasta su análisis, y otra parte se extirpó y se fijó en una solución al 10 %.formalinasolución; los tejidos restantes se almacenaron a -80 °C para el análisis histopatológico (Wang y otros, 2008,Hsu y otros, 2009,Nie y otros, 2015).

    Medición de los parámetros bioquímicos en el suero

    La lesión hepática se evaluó estimando laactividades enzimáticasDeterminación de ALT y AST séricas utilizando los kits comerciales correspondientes, según las instrucciones de cada kit (Nanjing, provincia de Jiangsu, China). Las actividades enzimáticas se expresaron en unidades por litro (U/l).

    Medición de MDA, SOD, GSH y GSH-Pxen homogeneizados de hígado

    Los tejidos hepáticos se homogeneizaron con solución salina fisiológica fría en una proporción de 1:9 (peso/volumen, hígado:solución salina). Los homogeneizados se centrifugaron (2500 ×gDurante 10 min) para recolectar los sobrenadantes para las determinaciones posteriores. El daño hepático se evaluó según las mediciones hepáticas de los niveles de MDA y GSH, así como de SOD y GSH-P.xTodas estas actividades se determinaron siguiendo las instrucciones del kit (Nanjing, provincia de Jiangsu, China). Los resultados de MDA y GSH se expresaron como nmol por mg de proteína (nmol/mg de proteína), y las actividades de SOD y GSH-Pxse expresaron como U por mg de proteína (U/mg prot).

    Análisis histopatológico

    Se fijaron porciones de hígado recién obtenido en una solución tamponada al 10%.paraformaldehídosolución de fosfato. La muestra se incrustó en parafina, se cortó en secciones de 3 a 5 μm y se tiñó conhematoxilinayeosina(H&E) según un procedimiento estándar, y finalmente analizado pormicroscopía óptica(Tian y otros, 2012).

    Análisis estadístico

    Los resultados se expresaron como media ± desviación estándar (DE). Se analizaron con el programa estadístico SPSS Statistics, versión 19.0. Los datos se sometieron a un análisis de varianza (ANOVA,p< 0,05), seguida de la prueba de Dunnett y la prueba T3 de Dunnett para determinar las diferencias estadísticamente significativas entre los valores de los distintos grupos experimentales. Se consideró una diferencia significativa a un nivel dep< 0,05.

    Resultados y discusión

    Componentes de la OEA

    Tras el análisis GC/MS, se encontró que el AEO contenía 25 constituyentes eluidos entre 10 y 35 min, y se identificaron 21 constituyentes que representan el 84 % del aceite esencial (Tabla 1). El aceite volátil contenidomonoterpenoides(80,9%), sesquiterpenoides (9,5%), hidrocarburos saturados no ramificados (4,86%) y acetileno misceláneo (4,86%). En comparación con otros estudios (Guo y otros, 2004), encontramos abundantes monoterpenoides (80,90 %) en el AEO. Los resultados mostraron que el componente más abundante del AEO es el β-citronelol (16,23 %). Otros componentes principales del AEO incluyen el 1,8-cineol (13,9 %).alcanfor(12,59%),linalol(11,33%), α-pineno (7,21%), β-pineno (3,99%),timol(3,22%), ymirceno(2,02%). La variación en la composición química puede estar relacionada con las condiciones ambientales a las que estuvo expuesta la planta, como el agua mineral, la luz solar, la etapa de desarrollo ynutrición.

  • Aceite puro de Saposhnikovia divaricata para la fabricación de velas y jabón. Aceite esencial para difusores al por mayor, nuevo para difusores de quemador de caña.

    Aceite puro de Saposhnikovia divaricata para la fabricación de velas y jabón. Aceite esencial para difusores al por mayor, nuevo para difusores de quemador de caña.

     

    2.1. Preparación de SDE

    Los rizomas de SD se adquirieron como hierba seca de Hanherb Co. (Guri, Corea). El material vegetal fue confirmado taxonómicamente por el Dr. Go-Ya Choi, del Instituto Coreano de Medicina Oriental (KIOM). Un ejemplar de referencia (número 2014 SDE-6) se depositó en el Herbario Coreano de Recursos Herbarios Estándar. Los rizomas secos de SD (320 g) se extrajeron dos veces con etanol al 70 % (con reflujo de 2 h) y el extracto se concentró a presión reducida. La decocción se filtró, se liofilizó y se almacenó a 4 °C. El rendimiento del extracto seco a partir de las materias primas crudas fue del 48,13 % (p/p).

     

    2.2. Análisis cuantitativo por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)

    El análisis cromatográfico se realizó con un sistema HPLC (Waters Co., Milford, MA, EE. UU.) y un detector de matriz de fotodiodos. Para el análisis HPLC de SDE, el prim-OEl estándar de glucosilcimifugina se adquirió del Instituto de Promoción de la Industria de la Medicina Tradicional de Corea (Gyeongsan, Corea), ysec-O-glucosilhamaudol y 4′-O-β-D-glucosil-5-O-metilvisaminol fueron aislados en nuestro laboratorio e identificados mediante análisis espectrales, principalmente por RMN y MS.

    Las muestras de SDE (0,1 mg) se disolvieron en etanol al 70 % (10 ml). La separación cromatográfica se realizó con una columna XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, EE. UU.). La fase móvil consistió en acetonitrilo (A) y ácido acético al 0,1 % en agua (B) a un caudal de 1,0 ml/min. Se utilizó un programa de gradiente multietapa: 5 % A (0 min), 5-20 % A (0-10 min), 20 % A (10-23 min) y 20-65 % A (23-40 min). La longitud de onda de detección se escaneó a 210-400 nm y se registró a 254 nm. El volumen de inyección fue de 10,0μL. Se prepararon soluciones estándar para la determinación de tres cromonas a una concentración final de 7,781 mg/mL (prim-O-glucosilcimifugina), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosil-5-O-metilvisaminol) y 31,125 mg/mL (sec-O-glucosilhamaudol) en metanol y se mantuvo a 4°C.

    2.3. Evaluación de la actividad antiinflamatoriaIn vitro
    2.3.1. Cultivo celular y tratamiento de muestras

    Las células RAW 264.7 se obtuvieron de la Colección Americana de Cultivos Tipo (ATCC, Manassas, VA, EE. UU.) y se cultivaron en medio DMEM con 1 % de antibióticos y 5,5 % de FBS. Las células se incubaron en una atmósfera humidificada con 5 % de CO₂ a 37 °C. Para estimular las células, el medio se reemplazó con medio DMEM fresco y lipopolisacárido (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, EE. UU.) a 1μSe añadió g/mL en presencia o ausencia de SDE (200 o 400μg/mL) durante 24 h más.

    2.3.2. Determinación de óxido nítrico (NO), prostaglandina E2 (PGE2), factor de necrosis tumoral-α(TNF-α) y la producción de interleucina-6 (IL-6)

    Las células se trataron con SDE y se estimularon con LPS durante 24 h. La producción de NO se analizó midiendo el nitrito con el reactivo de Griess, según un estudio previo [12]. Secreción de las citocinas inflamatorias PGE2, TNF-αLa IL-6 se determinó mediante un kit ELISA (R&D Systems) según las instrucciones del fabricante. Los efectos del SDE sobre la producción de NO y citocinas se determinaron a 540 nm o 450 nm con un Wallac EnVision.lector de microplacas (PerkinElmer).

    2.4. Evaluación de la actividad antiosteoartritisEn vivo
    2.4.1. Animales

    Se compraron ratas Sprague-Dawley macho (7 semanas de edad) de Samtako Inc. (Osan, Corea) y se alojaron en condiciones controladas con un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas.°C y% de humedad. Se proporcionó a las ratas una dieta de laboratorio y agua.ad libitumTodos los procedimientos experimentales se realizaron de conformidad con las directrices de los Institutos Nacionales de Salud (NIH) y fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Daejeon (Daejeon, República de Corea).

    2.4.2. Inducción de OA con MIA en ratas

    Los animales fueron aleatorizados y asignados a grupos de tratamiento antes del inicio del estudio (por grupo). Solución de MIA (3 mg/50μSe inyectó directamente 1 litro de solución salina al 0,9 % en el espacio intraarticular de la rodilla derecha bajo anestesia inducida con una mezcla de ketamina y xilazina. Las ratas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: (1) grupo salino sin inyección de MIA, (2) grupo MIA con inyección de MIA, (3) grupo tratado con SDE (200 mg/kg) con inyección de MIA, y (4) grupo tratado con indometacina (IM) (2 mg/kg) con inyección de MIA. Se administró a las ratas SDE por vía oral e IM una semana antes de la inyección de MIA durante 4 semanas. La dosis de SDE e IM utilizada en este estudio se basó en las empleadas en estudios previos [10,13,14].

    2.4.3. Mediciones de la distribución del peso soportado por las patas traseras

    Tras la inducción de OA, se alteró el equilibrio original en la capacidad de carga de las patas traseras. Se utilizó un comprobador de incapacidad (Linton Instrumentation, Norfolk, Reino Unido) para evaluar los cambios en la tolerancia a la carga. Las ratas se colocaron cuidadosamente en la cámara de medición. Se promedió la fuerza de carga ejercida por la pata trasera durante un periodo de 3 s. La relación de distribución del peso se calculó mediante la siguiente ecuación: [peso en la pata trasera derecha / (peso en la pata trasera derecha + peso en la pata trasera izquierda)] × 100 [15].

    2.4.4. Mediciones de los niveles séricos de citocinas

    Las muestras de sangre se centrifugaron a 1500 g durante 10 minutos a 4 °C; posteriormente, se recogió el suero y se conservó a -70 °C hasta su uso. Se midieron los niveles de IL-1.β, IL-6, TNF-α, y PGE2 en el suero se midieron utilizando kits ELISA de R&D Systems (Minneapolis, MN, EE. UU.) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

    2.4.5. Análisis de RT-PCR cuantitativa en tiempo real

    El ARN total se extrajo del tejido de la articulación de la rodilla con el reactivo TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.), se transcribió de forma inversa a ADNc y se amplificó por PCR con el kit TM One Step RT PCR y SYBR green (Applied Biosystems, Grand Island, NY, EE. UU.). La PCR cuantitativa en tiempo real se realizó con el sistema de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, EE. UU.). Las secuencias de los cebadores y la secuencia de la sonda se muestran en la Tabla.1Se amplificaron alícuotas de ADNc de muestra y una cantidad igual de ADNc de GAPDH con la mezcla maestra de PCR TaqMan® Universal que contiene ADN polimerasa, según las instrucciones del fabricante (Applied Biosystems, Foster, CA, EE. UU.). Las condiciones de PCR fueron: 2 min a 50 °C, 10 min a 94 °C, 15 s a 95 °C y 1 min a 60 °C durante 40 ciclos. La concentración del gen diana se determinó mediante el método comparativo Ct (número de ciclos umbral en el punto de cruce entre la gráfica de amplificación y el umbral), según las instrucciones del fabricante.