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  • Aceite portador de semillas de jojoba orgánico prensado en frío para masajes para el cuidado de la piel

    Aceite portador de semillas de jojoba orgánico prensado en frío para masajes para el cuidado de la piel

    Los principales componentes del aceite de jojoba natural son el ácido palmítico, el ácido erúcico, el ácido oleico y el ácido gadoleico. El aceite de jojoba también es rico en vitaminas como la vitamina E y el complejo de vitamina B.
    La cera vegetal líquida de la Planta de Jojoba es de color dorado. El aceite de jojoba a base de hierbas tiene un aroma característico a nuez y es un complemento preferido para los productos de cuidado personal como cremas, maquillaje, champú, etc. El aceite de jojoba a base de hierbas medicinales se puede aplicar directamente sobre la piel para las quemaduras solares, la psoriasis y el acné. El aceite de jojoba puro también promueve el crecimiento del cabello.

    荷荷巴油021

  • Aceite esencial de lavanda orgánico puro natural para el cuidado de la piel con aromaterapia

    Aceite esencial de lavanda orgánico puro natural para el cuidado de la piel con aromaterapia

    Método de extracción o procesamiento: destilado al vapor.

    Parte de extracción de destilación: flor.

    Origen del país: China

    Aplicación: Difusión/aromaterapia/masaje

    Vida útil: 3 años

    Servicio personalizado: etiqueta y caja personalizadas o según sus requisitos

    Certificación:GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

  • Aceite esencial orgánico natural puro del aceite de corteza de Magnoliae Officmalis del 100% para el cuidado de la piel

    Aceite esencial orgánico natural puro del aceite de corteza de Magnoliae Officmalis del 100% para el cuidado de la piel

    La fragancia de Hou Po es inmediatamente amarga y picante y luego se abre gradualmente con una dulzura y calidez profundas y almibaradas.

    La afinidad de Hou Po es con los elementos Tierra y Metal, donde su amargo calor actúa fuertemente para hacer descender el Qi y la humedad seca. Por estas cualidades, se utiliza en la medicina china para aliviar el estancamiento y la acumulación en el tracto digestivo, así como la tos y las sibilancias debidas a la flema que obstruye los pulmones.

    Magnolia Officinials es un árbol de hoja caduca originario de las montañas y valles de Sichuan, Hubei y otras provincias de China. La corteza altamente aromática utilizada en la medicina tradicional china se extrae de los tallos, ramas y raíces y se recolecta de abril a junio. La corteza gruesa y lisa, cargada de aceite, tiene un color violáceo en el lado interior con un brillo cristalino.

    Los practicantes pueden considerar combinar Hou Po con aceite esencial de Qing Pi como un complemento de nota alta en mezclas destinadas a romper acumulaciones.

  • Paquete personalizado OEM Aceite natural de rizoma de Macrocephalae

    Paquete personalizado OEM Aceite natural de rizoma de Macrocephalae

    Como agente quimioterapéutico eficaz, el 5-fluorouracilo (5-FU) se aplica ampliamente para el tratamiento de tumores malignos en el tracto gastrointestinal, cabeza, cuello, tórax y ovario. Y el 5-FU es el fármaco de primera línea para el cáncer colorrectal en la clínica. El mecanismo de acción del 5-FU es bloquear la transformación del ácido nucleico uracilo en ácido nucleico timina en las células tumorales, luego afecta la síntesis y reparación del ADN y el ARN para lograr su efecto citotóxico (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). Sin embargo, el 5-FU también produce diarrea inducida por quimioterapia (DIC), una de las reacciones adversas más comunes que afecta a muchos pacientes (Filho et al., 2016). La incidencia de diarrea en pacientes tratados con 5-FU fue de hasta 50% a 80%, lo que afectó gravemente el progreso y la eficacia de la quimioterapia (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). En consecuencia, es de gran importancia encontrar una terapia eficaz para la CID inducida por 5-FU.

    En la actualidad, se han importado intervenciones farmacológicas y no farmacológicas al tratamiento clínico de la DIC. Las intervenciones no farmacológicas incluyen una dieta razonable y suplementos con sal, azúcar y otros nutrientes. Fármacos como la loperamida y la octreotida se utilizan habitualmente en el tratamiento antidiarreico de la CID (Benson et al., 2004). Además, en varios países también se adoptan etnomedicinas para tratar la DIC con su propia terapia única. La medicina tradicional china (MTC) es una etnomedicina típica que se practica desde hace más de 2000 años en países del este de Asia, incluidos China, Japón y Corea (Qi et al., 2010). La medicina tradicional china sostiene que los fármacos quimioterapéuticos desencadenarían el consumo de Qi, la deficiencia del bazo, la falta de armonía estomacal y la humedad endofítica, lo que daría como resultado una disfunción conductiva de los intestinos. En la teoría de la medicina tradicional china, la estrategia de tratamiento de la CID debería depender principalmente de complementar el Qi y fortalecer el bazo (Wang et al., 1994).

    Las raíces secas deAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) yPanax ginsengCA Mey. (PG) son las medicinas a base de hierbas típicas en la medicina tradicional china con los mismos efectos de complementar el Qi y fortalecer el bazo (Li et al., 2014). AM y PG generalmente se usan como par de hierbas (la forma más simple de compatibilidad de hierbas chinas) con los efectos de complementar el Qi y fortalecer el bazo para tratar la diarrea. Por ejemplo, AM y PG fueron documentados en fórmulas antidiarreicas clásicas como Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang deTaiping Huimin Heji Ju Fang(dinastía Song, China) y Bu Zhong Yi Qi Tang dePi Wei Lun(Dinastía Yuan, China) (Fig. 1). Varios estudios previos habían informado que las tres fórmulas poseen la capacidad de aliviar la CID (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Además, nuestro estudio anterior demostró que Shenzhu Capsule, que solo contiene AM y PG, tiene efectos potenciales en los tratamientos de la diarrea, la colitis (síndrome de xiexie) y otras enfermedades gastrointestinales (Feng et al., 2018). Sin embargo, ningún estudio ha analizado el efecto y el mecanismo de AM y PG en el tratamiento de la CID, ya sea en combinación o solos.

    Ahora se considera que la microbiota intestinal es un factor potencial para comprender el mecanismo terapéutico de la MTC (Feng et al., 2019). Los estudios modernos indican que la microbiota intestinal desempeña un papel crucial en el mantenimiento de la homeostasis intestinal. Una microbiota intestinal sana contribuye a la protección de la mucosa intestinal, el metabolismo, la homeostasis y la respuesta inmunitarias y la supresión de patógenos (Thursby y Juge, 2017; Pickard et al., 2017). La microbiota intestinal desordenada perjudica las funciones fisiológicas e inmunes del cuerpo humano directa o indirectamente, induciendo reacciones secundarias como diarrea (Patel et al., 2016; Zhao y Shen, 2010). Las investigaciones habían demostrado que el 5-FU cambió notablemente la estructura de la microbiota intestinal en ratones diarreicos (Li et al., 2017). Por lo tanto, los efectos de la mañana y la tarde sobre la diarrea inducida por 5-FU pueden estar mediados por la microbiota intestinal. Sin embargo, aún se desconoce si AM y PG solos o en combinación podrían prevenir la diarrea inducida por 5-FU mediante la modulación de la microbiota intestinal.

    Para investigar los efectos antidiarreicos y el mecanismo subyacente de AM y PG, utilizamos 5-FU para simular un modelo de diarrea en ratones. Aquí, nos centramos en los efectos potenciales de la administración única y combinada (AP) deAtractylodes macrocephalaaceite esencial (AMO) yPanax ginsengsaponinas totales (PGS), los componentes activos extraídos respectivamente de AM y PG, sobre la diarrea, la patología intestinal y la estructura microbiana después de la quimioterapia con 5-FU.

  • Aceite esencial 100% puro y natural de Eucommiae Foliuml para el cuidado de la piel

    Aceite esencial 100% puro y natural de Eucommiae Foliuml para el cuidado de la piel

    Eucommia ulmoides(UE) (comúnmente llamado “Du Zhong” en idioma chino) pertenece a la familia Eucommiaceae, un género de árbol pequeño originario de China central [1]. Esta planta se cultiva ampliamente en China a gran escala debido a su importancia medicinal. Se han aislado alrededor de 112 compuestos de la UE, que incluyen lignanos, iridoides, fenólicos, esteroides y otros compuestos. La fórmula de hierbas complementarias de esta planta (como el delicioso té) ha demostrado algunas propiedades medicinales. La hoja de EU tiene mayor actividad relacionada con la corteza, la flor y el fruto [2,3]. Se ha informado que las hojas de UE mejoran la fuerza de los huesos y los músculos del cuerpo [4], lo que conduce a la longevidad y promueve la fertilidad en los seres humanos [5]. Se informó que la deliciosa fórmula de té elaborada con hojas de UE reduce la grasa y mejora el metabolismo energético. Se ha informado que los compuestos flavonoides (como la rutina, el ácido clorogénico, el ácido ferúlico y el ácido cafeico) exhiben actividad antioxidante en las hojas de EU.6].

    Aunque ha habido suficiente literatura sobre las propiedades fitoquímicas de la UE, existen pocos estudios sobre las propiedades farmacológicas de los diversos compuestos extraídos de las cortezas, semillas, tallos y hojas de la UE. Este artículo de revisión dilucidará información detallada sobre diferentes compuestos extraídos de las distintas partes (cortezas, semillas, tallo y hojas) de la UE y los usos potenciales de estos compuestos en propiedades promotoras de la salud con líneas de evidencia científica y, por lo tanto, proporcionará un material de referencia. para la aplicación de la UE.

  • Aceite natural puro de Houttuynia cordata Aceite de Houttuynia Cordata Aceite de Lchthammolum

    Aceite natural puro de Houttuynia cordata Aceite de Houttuynia Cordata Aceite de Lchthammolum

    En la mayoría de los países en desarrollo, entre el 70% y el 95% de la población depende de las medicinas tradicionales para la atención primaria de salud y, de ellos, el 85% utiliza plantas o sus extractos como principio activo.1] La búsqueda de nuevos compuestos biológicamente activos a partir de plantas suele depender de la información étnica y popular específica obtenida de los médicos locales y todavía se considera una fuente importante para el descubrimiento de fármacos. En la India, aproximadamente 2.000 medicamentos son de origen vegetal.[2] En vista del interés generalizado en el uso de plantas medicinales, la presente revisión sobreHouttuynia cordataThunb. proporciona información actualizada con referencia a estudios botánicos, comerciales, etnofarmacológicos, fitoquímicos y farmacológicos que aparecen en la literatura.H. cordataThunb. pertenece a la familiaSaururáceasy se le conoce comúnmente como cola de lagarto chino. Es una hierba perenne con rizoma estolonífero que tiene dos quimiotipos distintos.3,4] El quimiotipo chino de la especie se encuentra en condiciones salvajes y semisalvajes en el noreste de la India de abril a septiembre.[5,6,7]H. cordataestá disponible en la India, especialmente en el valle de Brahmaputra de Assam y es utilizado por varias tribus de Assam en forma de vegetal y tradicionalmente con diversos fines medicinales.

  • Fabricante de aceite de Arctium lappa 100% puro: aceite de lima natural Arctium lappa con certificados de garantía de calidad

    Fabricante de aceite de Arctium lappa 100% puro: aceite de lima natural Arctium lappa con certificados de garantía de calidad

    Beneficios para la salud

    La raíz de bardana se suele comer, pero también se puede secar y preparar en té. Funciona bien como fuente de inulina, unaprebióticoFibra que ayuda a la digestión y mejora la salud intestinal. Además, esta raíz contiene flavonoides (nutrientes vegetales),fitoquímicosy antioxidantes que se sabe que tienen beneficios para la salud.

    Además, la raíz de bardana puede aportar otros beneficios como:

    Reducir la inflamación crónica

    La raíz de bardana contiene varios antioxidantes, como quercetina, ácidos fenólicos y luteolina, que pueden ayudar a proteger las células contraradicales libres. Estos antioxidantes ayudan a reducir la inflamación en todo el cuerpo.

    Riesgos para la salud

    La raíz de bardana se considera segura para comer o beber como té. Sin embargo, esta planta se parece mucho a las plantas de belladona, que son tóxicas. Se recomienda comprar raíz de bardana únicamente a vendedores de confianza y abstenerse de recolectarla por su cuenta. Además, existe información mínima sobre sus efectos en niños o mujeres embarazadas. Hable con su médico antes de usar la raíz de bardana con niños o si está embarazada.

    Aquí hay algunos otros posibles riesgos para la salud a considerar si se usa raíz de bardana:

    Mayor deshidratación

    La raíz de bardana actúa como un diurético natural, lo que puede provocar deshidratación. Si toma diuréticos u otros diuréticos, no debe tomar raíz de bardana. Si toma estos medicamentos, es importante que conozca otros medicamentos, hierbas e ingredientes que pueden provocar deshidratación.

    Reacción alérgica

    Si es sensible o tiene antecedentes de reacciones alérgicas a las margaritas, la ambrosía o los crisantemos, tiene un mayor riesgo de sufrir una reacción alérgica a la raíz de bardana.

     

  • Precio al por mayor a granel 100% aceite puro de AsariRadix Et Rhizoma Relax aromaterapia Eucalyptus globulus

    Precio al por mayor a granel 100% aceite puro de AsariRadix Et Rhizoma Relax aromaterapia Eucalyptus globulus

    Estudios en animales e in vitro han investigado los posibles efectos antifúngicos, antiinflamatorios y cardiovasculares del sasafrás y sus componentes. Sin embargo, faltan ensayos clínicos y el uso del sasafrás no se considera seguro. El safrol, el componente principal de la corteza y el aceite de la raíz de sasafrás, ha sido prohibido por la Administración de Alimentos y Medicamentos de EE. UU. (FDA), incluso para su uso como saborizante o fragancia, y no debe usarse interna o externamente, ya que es potencialmente cancerígeno. El safrol se ha utilizado en la producción ilegal de 3,4-metilendioximetanfetamina (MDMA), también conocida con los nombres callejeros de “éxtasis” o “Molly”, y la venta de safrol y aceite de sasafrás es supervisada por la Agencia Antidrogas de EE.UU.

  • Precio al por mayor a granel 100% aceite esencial puro Stellariae Radix (nuevo) aromaterapia relajante Eucalyptus globulus

    Precio al por mayor a granel 100% aceite esencial puro Stellariae Radix (nuevo) aromaterapia relajante Eucalyptus globulus

    La Farmacopea China (edición 2020) exige que el extracto metanólico de YCH no sea inferior al 20,0% [2], sin especificar otros indicadores de evaluación de la calidad. Los resultados de este estudio muestran que el contenido de los extractos metanólicos de las muestras silvestres y cultivadas cumplieron con el estándar de la farmacopea y no hubo diferencias significativas entre ellos. Por lo tanto, no hubo diferencia de calidad aparente entre las muestras silvestres y cultivadas, según ese índice. Sin embargo, los contenidos de esteroles totales y flavonoides totales en las muestras silvestres fueron significativamente mayores que los de las muestras cultivadas. Un análisis metabolómico adicional reveló una abundante diversidad de metabolitos entre las muestras silvestres y cultivadas. Además, se descartaron 97 metabolitos significativamente diferentes, que se enumeran en laTabla complementaria S2. Entre estos metabolitos significativamente diferentes se encuentran el β-sitosterol (ID es M397T42) y los derivados de quercetina (M447T204_2), que se ha informado que son ingredientes activos. Entre los metabolitos diferenciales también se incluyeron componentes no informados anteriormente, como trigonelina (M138T291_2), betaína (M118T277_2), fustina (M269T36), rotenona (M241T189), arctiína (M557T165) y ácido logánico (M399T284_2). Estos componentes desempeñan diversas funciones en la antioxidante, antiinflamatoria, eliminadora de radicales libres, anticancerígena y en el tratamiento de la aterosclerosis y, por lo tanto, podrían constituir supuestos componentes activos novedosos en YCH. El contenido de ingredientes activos determina la eficacia y calidad de los materiales medicinales [7]. En resumen, el extracto de metanol como único índice de evaluación de calidad YCH tiene algunas limitaciones y es necesario explorar más a fondo marcadores de calidad más específicos. Hubo diferencias significativas en los esteroles totales, los flavonoides totales y el contenido de muchos otros metabolitos diferenciales entre el YCH silvestre y el cultivado; por lo tanto, existían potencialmente algunas diferencias de calidad entre ellos. Al mismo tiempo, los posibles ingredientes activos del YCH recientemente descubiertos podrían tener un valor de referencia importante para el estudio de la base funcional del YCH y el desarrollo posterior de los recursos del YCH.

    La importancia de los materiales medicinales genuinos ha sido reconocida desde hace mucho tiempo en la región específica de origen para producir hierbas medicinales chinas de excelente calidad.8]. La alta calidad es un atributo esencial de los materiales medicinales genuinos, y el hábitat es un factor importante que afecta la calidad de dichos materiales. Desde que el YCH comenzó a utilizarse como medicamento, durante mucho tiempo ha estado dominado por el YCH salvaje. Tras la exitosa introducción y domesticación del YCH en Ningxia en la década de 1980, la fuente de materiales medicinales de Yinchaihu pasó gradualmente del YCH silvestre al cultivado. Según una investigación previa de fuentes de YCH [9] y la investigación de campo de nuestro grupo de investigación, existen diferencias significativas en las áreas de distribución de los materiales medicinales cultivados y silvestres. El YCH silvestre se distribuye principalmente en la Región Autónoma Hui de Ningxia de la Provincia de Shaanxi, adyacente a la zona árida de Mongolia Interior y Ningxia central. En particular, la estepa desértica de estas zonas es el hábitat más adecuado para el crecimiento del YCH. Por el contrario, el YCH cultivado se distribuye principalmente al sur del área de distribución silvestre, como el condado de Tongxin (Cultivado I) y sus alrededores, que se ha convertido en la base de cultivo y producción más grande de China, y el condado de Pengyang (Cultivado II). , que se encuentra en una zona más al sur y es otra zona productora de YCH cultivado. Además, los hábitats de las dos zonas cultivadas mencionadas no son estepas desérticas. Por lo tanto, además del modo de producción, también existen diferencias significativas en el hábitat de los YCH silvestres y cultivados. El hábitat es un factor importante que afecta la calidad de los materiales medicinales a base de hierbas. Los diferentes hábitats afectarán la formación y acumulación de metabolitos secundarios en las plantas, afectando así la calidad de los productos medicinales.10,11]. Por lo tanto, las diferencias significativas en el contenido de flavonoides totales y esteroles totales y la expresión de los 53 metabolitos que encontramos en este estudio podrían ser el resultado de diferencias en el manejo del campo y el hábitat.
    Una de las principales formas en que el medio ambiente influye en la calidad de los materiales medicinales es ejerciendo estrés sobre las plantas de origen. El estrés ambiental moderado tiende a estimular la acumulación de metabolitos secundarios [12,13]. La hipótesis del equilibrio crecimiento/diferenciación establece que, cuando los nutrientes son suficientes, las plantas crecen principalmente, mientras que cuando los nutrientes son deficientes, las plantas se diferencian y producen más metabolitos secundarios.14]. El estrés por sequía causado por la deficiencia de agua es el principal estrés ambiental que enfrentan las plantas en zonas áridas. En este estudio, la condición del agua del YCH cultivado es más abundante, con niveles de precipitación anual significativamente más altos que los del YCH silvestre (el suministro de agua para el Cultivado I fue aproximadamente 2 veces mayor que el del Silvestre; el Cultivado II fue aproximadamente 3,5 veces mayor que el del Silvestre). ). Además, el suelo en el entorno salvaje es suelo arenoso, pero el suelo en las tierras de cultivo es suelo arcilloso. En comparación con la arcilla, el suelo arenoso tiene poca capacidad de retención de agua y es más probable que agrave el estrés por sequía. Al mismo tiempo, el proceso de cultivo iba acompañado a menudo de riego, por lo que el grado de estrés por sequía era bajo. El YCH silvestre crece en hábitats áridos naturales hostiles y, por lo tanto, puede sufrir un estrés por sequía más grave.
    La osmorregulación es un importante mecanismo fisiológico mediante el cual las plantas enfrentan el estrés por sequía, y los alcaloides son importantes reguladores osmóticos en las plantas superiores.15]. Las betaínas son compuestos alcaloides de amonio cuaternario solubles en agua y pueden actuar como osmoprotectores. El estrés por sequía puede reducir el potencial osmótico de las células, mientras que los osmoprotectores preservan y mantienen la estructura y la integridad de las macromoléculas biológicas y alivian eficazmente el daño causado por el estrés por sequía a las plantas.16]. Por ejemplo, bajo estrés por sequía, el contenido de betaína de la remolacha azucarera y Lycium barbarum aumentó significativamente [17,18]. La trigonelina es un regulador del crecimiento celular y, bajo estrés por sequía, puede extender la duración del ciclo celular de la planta, inhibir el crecimiento celular y provocar una reducción del volumen celular. El aumento relativo de la concentración de soluto en la célula permite a la planta lograr una regulación osmótica y mejorar su capacidad para resistir el estrés por sequía.19]. JIA X [20] descubrió que, con un aumento en el estrés por sequía, Astragalus membranaceus (una fuente de la medicina tradicional china) producía más trigonelina, que actúa para regular el potencial osmótico y mejorar la capacidad de resistir el estrés por sequía. También se ha demostrado que los flavonoides desempeñan un papel importante en la resistencia de las plantas al estrés por sequía.21,22]. Un gran número de estudios han confirmado que el estrés por sequía moderada favorecía la acumulación de flavonoides. Lang Duo-Yong et al. [23] comparó los efectos del estrés por sequía en YCH controlando la capacidad de retención de agua en el campo. Se encontró que el estrés por sequía inhibía el crecimiento de las raíces hasta cierto punto, pero en estrés por sequía moderado y severo (40% de la capacidad de retención de agua del campo), el contenido total de flavonoides en YCH aumentaba. Mientras tanto, bajo estrés por sequía, los fitoesteroles pueden actuar para regular la fluidez y permeabilidad de la membrana celular, inhibir la pérdida de agua y mejorar la resistencia al estrés.24,25]. Por lo tanto, la mayor acumulación de flavonoides totales, esteroles totales, betaína, trigonelina y otros metabolitos secundarios en el YCH silvestre podría estar relacionada con el estrés por sequía de alta intensidad.
    En este estudio, se realizó un análisis de enriquecimiento de la vía KEGG en los metabolitos que resultaron ser significativamente diferentes entre el YCH silvestre y el cultivado. Los metabolitos enriquecidos incluyeron aquellos involucrados en las vías del metabolismo del ascorbato y aldarato, la biosíntesis de aminoacil-ARNt, el metabolismo de la histidina y el metabolismo de la beta-alanina. Estas vías metabólicas están estrechamente relacionadas con los mecanismos de resistencia al estrés de las plantas. Entre ellos, el metabolismo del ascorbato juega un papel importante en la producción de antioxidantes de las plantas, el metabolismo del carbono y el nitrógeno, la resistencia al estrés y otras funciones fisiológicas.26]; La biosíntesis de aminoacil-ARNt es una vía importante para la formación de proteínas.27,28], que participa en la síntesis de proteínas resistentes al estrés. Tanto la vía de la histidina como la de la β-alanina pueden mejorar la tolerancia de las plantas al estrés ambiental.29,30]. Esto indica además que las diferencias en los metabolitos entre el YCH silvestre y el cultivado estaban estrechamente relacionados con los procesos de resistencia al estrés.
    El suelo es la base material para el crecimiento y desarrollo de las plantas medicinales. El nitrógeno (N), el fósforo (P) y el potasio (K) del suelo son elementos nutrientes importantes para el crecimiento y desarrollo de las plantas. La materia orgánica del suelo también contiene N, P, K, Zn, Ca, Mg y otros macroelementos y oligoelementos necesarios para las plantas medicinales. Los nutrientes excesivos o deficientes, o las proporciones de nutrientes desequilibradas, afectarán el crecimiento, el desarrollo y la calidad de los materiales medicinales, y diferentes plantas tienen diferentes necesidades de nutrientes.31,32,33]. Por ejemplo, un bajo estrés de N promovió la síntesis de alcaloides en Isatis indigotica y fue beneficioso para la acumulación de flavonoides en plantas como Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge y Dichondra repens Forst. Por el contrario, demasiado N inhibió la acumulación de flavonoides en especies como Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis y Ginkgo biloba, y afectó la calidad de los materiales medicinales.34]. La aplicación de fertilizante fosfatado fue eficaz para aumentar el contenido de ácido glicirrícico y dihidroacetona en el regaliz de los Urales.35]. Cuando la cantidad de aplicación superó los 0,12 kg·m-2, el contenido total de flavonoides en Tussilago farfara disminuyó [36]. La aplicación de un fertilizante fosfatado tuvo un efecto negativo sobre el contenido de polisacáridos en el rhizoma polygonati de la medicina tradicional china.37], pero un fertilizante K fue efectivo para aumentar su contenido de saponinas [38]. La aplicación de 450 kg·hm-2 K de fertilizante fue lo mejor para el crecimiento y la acumulación de saponina de Panax notoginseng de dos años de edad [39]. Bajo la proporción de N:P:K = 2:2:1, las cantidades totales de extracto hidrotermal, harpagida y harpagosido fueron las más altas [40]. La alta proporción de N, P y K fue beneficiosa para promover el crecimiento de Pogostemon cablin y aumentar el contenido de aceite volátil. Una baja proporción de N, P y K aumentó el contenido de los principales componentes efectivos del aceite de hoja de tallo de Pogostemon cablin [41]. YCH es una planta tolerante a suelos áridos y podría tener requisitos específicos de nutrientes como N, P y K. En este estudio, en comparación con el YCH cultivado, el suelo de las plantas silvestres de YCH era relativamente estéril: el contenido del suelo de materia orgánica, N total, P total y K total fueron aproximadamente 1/10, 1/2, 1/3 y 1/3 de los de las plantas cultivadas, respectivamente. Por lo tanto, las diferencias en los nutrientes del suelo podrían ser otra razón de las diferencias entre los metabolitos detectados en el YCH cultivado y silvestre. Weibao Ma et al. [42] encontró que la aplicación de una cierta cantidad de fertilizante N y fertilizante P mejoraba significativamente el rendimiento y la calidad de las semillas. Sin embargo, el efecto de los elementos nutrientes sobre la calidad de YCH no está claro y las medidas de fertilización para mejorar la calidad de los materiales medicinales necesitan más estudios.
    Las hierbas medicinales chinas tienen las características de "Los hábitats favorables promueven el rendimiento y los hábitats desfavorables mejoran la calidad" [43]. En el proceso de cambio gradual de YCH silvestre a cultivado, el hábitat de las plantas cambió de la estepa desértica árida y estéril a tierras de cultivo fértiles con agua más abundante. El hábitat del YCH cultivado es superior y el rendimiento es mayor, lo que resulta útil para satisfacer la demanda del mercado. Sin embargo, este hábitat superior provocó cambios significativos en los metabolitos de YCH; Será necesario seguir investigando si esto contribuye a mejorar la calidad del YCH y cómo lograr una producción de alta calidad de YCH a través de medidas de cultivo basadas en la ciencia.
    El cultivo de hábitat simulado es un método para simular el hábitat y las condiciones ambientales de plantas medicinales silvestres, basado en el conocimiento de la adaptación a largo plazo de las plantas a tensiones ambientales específicas.43]. Al simular diversos factores ambientales que afectan a las plantas silvestres, especialmente el hábitat original de las plantas utilizadas como fuente de materiales medicinales auténticos, el enfoque utiliza un diseño científico y una intervención humana innovadora para equilibrar el crecimiento y el metabolismo secundario de las plantas medicinales chinas.43]. El método tiene como objetivo lograr las disposiciones óptimas para el desarrollo de materiales medicinales de alta calidad. El cultivo de hábitat simulado debería proporcionar una forma eficaz de producir YCH de alta calidad incluso cuando la base farmacodinámica, los marcadores de calidad y los mecanismos de respuesta a los factores ambientales no estén claros. En consecuencia, sugerimos que el diseño científico y las medidas de manejo de campo en el cultivo y producción de YCH se lleven a cabo con referencia a las características ambientales del YCH silvestre, como las condiciones del suelo árido, estéril y arenoso. Al mismo tiempo, también se espera que los investigadores lleven a cabo investigaciones más profundas sobre la base del material funcional y los marcadores de calidad del YCH. Estos estudios pueden proporcionar criterios de evaluación más eficaces para YCH y promover la producción de alta calidad y el desarrollo sostenible de la industria.
  • Aceite de hierbas Fructus Amomi Masaje natural Difusores 1 kg A granel Aceite esencial de Amomum villosum

    Aceite de hierbas Fructus Amomi Masaje natural Difusores 1 kg A granel Aceite esencial de Amomum villosum

    La familia Zingiberaceae ha atraído cada vez más atención en la investigación alelopática debido a los ricos aceites volátiles y la aromaticidad de sus especies miembros. Investigaciones anteriores habían demostrado que los químicos de Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] y Zingiber officinale Rosc. [42] de la familia del jengibre tienen efectos alelopáticos sobre la germinación de semillas y el crecimiento de plántulas de maíz, lechuga y tomate. Nuestro estudio actual es el primer informe sobre la actividad alelopática de volátiles de tallos, hojas y frutos jóvenes de A. villosum (un miembro de la familia Zingiberaceae). El rendimiento de aceite de tallos, hojas y frutos jóvenes fue de 0,15%, 0,40% y 0,50%, respectivamente, lo que indica que los frutos produjeron una mayor cantidad de aceites volátiles que los tallos y las hojas. Los principales componentes de los aceites volátiles de los tallos fueron β-pineno, β-felandreno y α-pineno, que era un patrón similar al de los principales químicos del aceite de hoja, β-pineno y α-pineno (hidrocarburos monoterpénicos). Por otro lado, el aceite de los frutos tiernos era rico en acetato de bornilo y alcanfor (monoterpenos oxigenados). Los resultados fueron respaldados por los hallazgos de Do N Dai [30,32] y Hui Ao [31] quien había identificado los aceites de diferentes órganos de A. villosum.

    Ha habido varios informes sobre las actividades inhibidoras del crecimiento vegetal de estos compuestos principales en otras especies. Shalinder Kaur descubrió que el α-pineno del eucalipto suprimía de manera prominente la longitud de la raíz y la altura de los brotes de Amaranthus viridis L. en una concentración de 1,0 μL [43], y otro estudio demostró que el α-pineno inhibía el crecimiento temprano de las raíces y causaba daño oxidativo en el tejido de las raíces a través de una mayor generación de especies reactivas de oxígeno [44]. Algunos informes han argumentado que el β-pineno inhibió la germinación y el crecimiento de las plántulas de las malezas de prueba en una respuesta dependiente de la dosis al alterar la integridad de la membrana.45], alterando la bioquímica de la planta y potenciando las actividades de las peroxidasas y polifenol oxidasas [46]. El β-felandreno exhibió una inhibición máxima de la germinación y el crecimiento de Vigna unguiculata (L.) Walp a una concentración de 600 ppm [47], mientras que, a una concentración de 250 mg/m3, el alcanfor suprimió el crecimiento de la radícula y de los brotes de Lepidium sativum L. [48]. Sin embargo, las investigaciones que informan sobre el efecto alelopático del acetato de bornilo son escasas. En nuestro estudio, los efectos alelopáticos del β-pineno, el acetato de bornilo y el alcanfor sobre la longitud de la raíz fueron más débiles que los de los aceites volátiles, excepto el α-pineno, mientras que el aceite de hoja, rico en α-pineno, también fue más fitotóxico que el volátil correspondiente. aceites de los tallos y frutos de A. villosum, ambos hallazgos indican que el α-pineno podría ser el químico importante para la alelopatía de esta especie. Al mismo tiempo, los resultados también implicaron que algunos compuestos del aceite de fruta que no eran abundantes podrían contribuir a la producción del efecto fitotóxico, un hallazgo que requiere más investigación en el futuro.
    En condiciones normales, el efecto alelopático de los aleloquímicos es específico de cada especie. Jiang et al. encontraron que el aceite esencial producido por Artemisia sieversiana ejerció un efecto más potente sobre Amaranthus retroflexus L. que sobre Medicago sativa L., Poa annua L. y Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49]. En otro estudio, el aceite volátil de Lavandula angustifolia Mill. produjo diferentes grados de efectos fitotóxicos en diferentes especies de plantas. Lolium multiflorum Lam. fue la especie aceptora más sensible, inhibiendo el crecimiento del hipocótilo y la radícula en un 87,8% y 76,7%, respectivamente, con una dosis de 1 μL/mL de aceite, pero el crecimiento del hipocótilo de las plántulas de pepino apenas se vio afectado.20]. Nuestros resultados también mostraron que había una diferencia en la sensibilidad a los volátiles de A. villosum entre L. sativa y L. perenne.
    Los compuestos volátiles y aceites esenciales de una misma especie pueden variar cuantitativa y/o cualitativamente debido a las condiciones de crecimiento, partes de la planta y métodos de detección. Por ejemplo, un informe demostró que el piranoides (10,3%) y el β-cariofileno (6,6%) eran los principales compuestos de los volátiles emitidos por las hojas de Sambucus nigra, mientras que el benzaldehído (17,8%), el α-bulneseno (16,6%) y el tetracosano. (11,5%) fueron abundantes en los aceites extraídos de las hojas [50]. En nuestro estudio, los compuestos volátiles liberados por los materiales vegetales frescos tuvieron efectos alelopáticos más fuertes en las plantas de prueba que los aceites volátiles extraídos, y las diferencias en la respuesta están estrechamente relacionadas con las diferencias en los aleloquímicos presentes en las dos preparaciones. Las diferencias exactas entre compuestos volátiles y aceites deben investigarse más a fondo en experimentos posteriores.
    Las diferencias en la diversidad microbiana y la estructura de la comunidad microbiana en muestras de suelo a las que se habían agregado aceites volátiles estaban relacionadas con la competencia entre microorganismos, así como con cualquier efecto tóxico y la duración de los aceites volátiles en el suelo. Vokou y Liotiri [51] encontró que la aplicación respectiva de cuatro aceites esenciales (0,1 ml) al suelo cultivado (150 g) activó la respiración de las muestras de suelo, incluso los aceites diferían en su composición química, lo que sugiere que los aceites vegetales se utilizan como fuente de carbono y energía por microorganismos presentes en el suelo. Los datos obtenidos del estudio actual confirmaron que los aceites de toda la planta de A. villosum contribuyeron al aumento obvio en el número de especies de hongos del suelo hacia el día 14 después de la adición del aceite, lo que indica que el aceite puede proporcionar una fuente de carbono para más hongos del suelo. Otro estudio informó un hallazgo: los microorganismos del suelo recuperaron su función y biomasa inicial después de un período temporal de variación inducido por la adición de aceite de Thymbra capitata L. (Cav), pero el aceite en la dosis más alta (0,93 µL de aceite por gramo de suelo) no permitió que los microorganismos del suelo recuperaran la funcionalidad inicial [52]. En el estudio actual, basado en el análisis microbiológico del suelo después de ser tratado con diferentes días y concentraciones, especulamos que la comunidad bacteriana del suelo se recuperaría después de más días. Por el contrario, la microbiota fúngica no puede volver a su estado original. Los siguientes resultados confirman esta hipótesis: el efecto distintivo de la alta concentración del aceite en la composición del microbioma fúngico del suelo fue revelado por el análisis de coordenadas principales (PCoA), y las presentaciones del mapa de calor confirmaron nuevamente que la composición de la comunidad fúngica del suelo tratados con 3,0 mg/mL de aceite (es decir, 0,375 mg de aceite por gramo de suelo) a nivel de género diferían considerablemente de los otros tratamientos. Actualmente, la investigación sobre los efectos de la adición de hidrocarburos monoterpénicos o monoterpenos oxigenados sobre la diversidad microbiana del suelo y la estructura comunitaria es aún escasa. Algunos estudios informaron que el α-pineno aumenta la actividad microbiana del suelo y la abundancia relativa de Methylophilaceae (un grupo de metilotrofos, Proteobacteria) en condiciones de bajo contenido de humedad, desempeñando un papel importante como fuente de carbono en suelos más secos.53]. De manera similar, el aceite volátil de la planta entera de A. villosum, que contiene 15,03% de α-pineno (Tabla complementaria S1), obviamente aumentó la abundancia relativa de Proteobacterias a 1,5 mg/mL y 3,0 mg/mL, lo que sugirió que el α-pineno posiblemente actúe como una de las fuentes de carbono para los microorganismos del suelo.
    Los compuestos volátiles producidos por diferentes órganos de A. villosum tenían diversos grados de efectos alelopáticos en L. sativa y L. perenne, que estaban estrechamente relacionados con los constituyentes químicos que contenían las partes de la planta de A. villosum. Aunque se confirmó la composición química del aceite volátil, se desconocen los compuestos volátiles liberados por A. villosum a temperatura ambiente, por lo que es necesario investigar más a fondo. Además, también merece la pena considerar el efecto sinérgico entre diferentes aleloquímicos. En términos de microorganismos del suelo, para explorar de manera integral el efecto del aceite volátil en los microorganismos del suelo, todavía necesitamos realizar una investigación más profunda: extender el tiempo de tratamiento del aceite volátil y discernir variaciones en la composición química del aceite volátil en el suelo. en días diferentes.
  • Aceite puro de Artemisia capillaris para fabricación de velas y jabón, aceite esencial para difusor al por mayor, nuevo para difusores de quemadores de caña

    Aceite puro de Artemisia capillaris para fabricación de velas y jabón, aceite esencial para difusor al por mayor, nuevo para difusores de quemadores de caña

    Diseño de modelo de roedores.

    Los animales se dividieron aleatoriamente en cinco grupos de quince ratones cada uno. Los ratones del grupo de control y del grupo modelo fueron alimentados con sondaaceite de sésamodurante 6 días. A los ratones del grupo de control positivo se les administraron tabletas de bifendato (BT, 10 mg/kg) durante 6 días. Los grupos experimentales fueron tratados con 100 mg/kg y 50 mg/kg de AEO disueltos en aceite de sésamo durante 6 días. El día 6, el grupo de control fue tratado con aceite de sésamo y todos los demás grupos fueron tratados con una dosis única de CCl4 al 0,2% en aceite de sésamo (10 ml/kg) porinyección intraperitoneal. Luego se dejó a los ratones en ayunas sin agua y se recogieron muestras de sangre de los vasos retrobulbares; La sangre recolectada se centrifugó a 3000 ×gdurante 10 min para separar el suero.dislocación cervicalse realizó inmediatamente después de la extracción de sangre y las muestras de hígado se extrajeron rápidamente. Una parte de la muestra de hígado se almacenó inmediatamente a -20 °C hasta su análisis, y otra parte se extirpó y se fijó en una solución al 10%.formalinasolución; los tejidos restantes se almacenaron a -80 ° C para el análisis histopatológico (Wang y otros, 2008,Hsu y otros, 2009,Nie et al., 2015).

    Medición de los parámetros bioquímicos en el suero.

    La lesión hepática se evaluó estimando laactividades enzimáticasde ALT y AST séricas utilizando los correspondientes kits comerciales según las instrucciones de los kits (Nanjing, Provincia de Jiangsu, China). Las actividades enzimáticas se expresaron en unidades por litro (U/l).

    Medición de MDA, SOD, GSH y GSH-Pxen homogeneizados de hígado

    Los tejidos del hígado se homogeneizaron con solución salina fisiológica fría en una proporción de 1:9 (p/v, hígado: solución salina). Los homogeneizados se centrifugaron (2500 ×gdurante 10 min) para recoger los sobrenadantes para las determinaciones posteriores. El daño hepático se evaluó según las mediciones hepáticas de los niveles de MDA y GSH, así como de la SOD y GSH-P.xactividades. Todos estos se determinaron siguiendo las instrucciones del kit (Nanjing, provincia de Jiangsu, China). Los resultados para MDA y GSH se expresaron como nmol por mg de proteína (nmol/mg prot), y las actividades de SOD y GSH-Pxse expresaron como U por mg de proteína (U/mg prot).

    Análisis histopatológico

    Se fijaron porciones de hígado recién obtenido en un tampón al 10%.paraformaldehídosolución de fosfato. Luego, la muestra se incluyó en parafina, se cortó en secciones de 3 a 5 µm y se tiñó conhematoxilinayeosina(H&E) según un procedimiento estándar, y finalmente analizado pormicroscopía óptica(Tian et al., 2012).

    Análisis estadístico

    Los resultados se expresaron como media ± desviación estándar (DE). Los resultados fueron analizados mediante el programa estadístico SPSS Statistics, versión 19.0. Los datos fueron sometidos a un análisis de varianza (ANOVA,p< 0,05) seguido de la prueba de Dunnett y la prueba T3 de Dunnett para determinar las diferencias estadísticamente significativas entre los valores de varios grupos experimentales. Se consideró una diferencia significativa a un nivel dep< 0,05.

    Resultados y discusión

    Componentes del OEA

    Tras el análisis GC/MS, se encontró que el AEO contenía 25 constituyentes eluidos de 10 a 35 minutos, y se identificaron 21 constituyentes que representan el 84% del aceite esencial (Tabla 1). El aceite volátil contenidomonoterpenoides(80,9%), sesquiterpenoides (9,5%), hidrocarburos saturados no ramificados (4,86%) y diversos acetileno (4,86%). En comparación con otros estudios (Guo y otros, 2004), encontramos abundantes monoterpenoides (80,90%) en el OEA. Los resultados mostraron que el constituyente más abundante del AEO es el β-citronelol (16,23%). Otros componentes importantes del AEO incluyen 1,8-cineol (13,9%),alcanfor(12,59%),linalol(11,33%), α-pineno (7,21%), β-pineno (3,99%),timol(3,22%), ymirceno(2,02%). La variación en la composición química puede estar relacionada con las condiciones ambientales a las que estuvo expuesta la planta, como agua mineral, luz solar, etapa de desarrollo ynutrición.

  • Aceite puro de Saposhnikovia divaricata para fabricación de velas y jabón, aceite esencial para difusor al por mayor, nuevo para difusores de quemadores de caña

    Aceite puro de Saposhnikovia divaricata para fabricación de velas y jabón, aceite esencial para difusor al por mayor, nuevo para difusores de quemadores de caña

     

    2.1. Preparación de SDE

    Los rizomas de SD se compraron como hierba seca de Hanherb Co. (Guri, Corea). Los materiales vegetales fueron confirmados taxonómicamente por el Dr. Go-Ya Choi del Instituto Coreano de Medicina Oriental (KIOM). Se depositó un espécimen de vale (número 2014 SDE-6) en el herbario coreano de recursos herbarios estándar. Los rizomas secos de SD (320 g) se extrajeron dos veces con etanol al 70% (con reflujo durante 2 h) y luego el extracto se concentró a presión reducida. La decocción se filtró, liofilizó y almacenó a 4°C. El rendimiento de extracto seco de los materiales de partida brutos fue del 48,13 % (p/p).

     

    2.2. Análisis cuantitativo de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC)

    El análisis cromatográfico se realizó con un sistema HPLC (Waters Co., Milford, MA, EE. UU.) y un detector de matriz de fotodiodos. Para el análisis por HPLC de SDE, la principalO-el estándar de glucosilcimifugina se adquirió del Instituto de Promoción de la Industria de la Medicina Tradicional de Corea (Gyeongsan, Corea), ysegundo-O-glucosilhamaudol y 4′-O-β-D-glucosil-5-O-metilvisamminol se aislaron en nuestro laboratorio y se identificaron mediante análisis espectrales, principalmente por RMN y EM.

    Se disolvieron muestras de SDE (0,1 mg) en etanol al 70% (10 ml). La separación cromatográfica se realizó con una columna XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, EE. UU.). La fase móvil consistió en acetonitrilo (A) y ácido acético al 0,1% en agua (B) a un caudal de 1,0 ml/min. Se utilizó un programa de gradiente de varios pasos de la siguiente manera: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min) y 20-65% A (23-40 min). ). La longitud de onda de detección se escaneó entre 210 y 400 nm y se registró a 254 nm. El volumen de inyección fue 10,0μL. Se prepararon soluciones estándar para la determinación de tres cromonas a una concentración final de 7,781 mg/mL (prim-O-glucosilcimifugina), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glucosil-5-O-metilvisamminol), y 31,125 mg/mL (segundo-O-glucosilhamaudol) en metanol y se mantuvo a 4ºC.

    2.3. Evaluación de la actividad antiinflamatoria.In Vitro
    2.3.1. Cultivo celular y tratamiento de muestras.

    Se obtuvieron células RAW 264.7 de la American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, EE. UU.) y se cultivaron en medio DMEM que contenía 1% de antibióticos y 5,5% de FBS. Las células se incubaron en una atmósfera humidificada con 5% de CO2 a 37°C. Para estimular las células, el medio se reemplazó con medio DMEM nuevo y lipopolisacárido (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, EE. UU.) a 1μSe añadió g/mL en presencia o ausencia de SDE (200 o 400μg/ml) durante 24 h adicionales.

    2.3.2. Determinación de Óxido Nítrico (NO), Prostaglandina E2 (PGE2), Factor de Necrosis Tumoral-α(TNF-α), y producción de interleucina-6 (IL-6)

    Las células fueron tratadas con SDE y estimuladas con LPS durante 24 h. La producción de NO se analizó midiendo nitrito usando el reactivo de Griess según un estudio previo [12]. Secreción de las citoquinas inflamatorias PGE2, TNF-αy la IL-6 se determinó utilizando un kit ELISA (sistemas R&D) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Los efectos de la SDE sobre la producción de NO y citocinas se determinaron a 540 nm o 450 nm utilizando un Wallac EnVision.Lector de microplacas (PerkinElmer).

    2.4. Evaluación de la actividad antiosteoartritisEn Vivo
    2.4.1. animales

    Se adquirieron ratas macho Sprague-Dawley (7 semanas de edad) de Samtako Inc. (Osan, Corea) y se alojaron en condiciones controladas con un ciclo de luz/oscuridad de 12 h a°C y% humedad. A las ratas se les proporcionó agua y dieta de laboratorio.ad libitum. Todos los procedimientos experimentales se realizaron de conformidad con las pautas de los Institutos Nacionales de Salud (NIH) y fueron aprobados por el Comité de Uso y Cuidado de Animales de la Universidad de Daejeon (Daejeon, República de Corea).

    2.4.2. Inducción de OA con MIA en ratas

    Los animales fueron aleatorizados y asignados a grupos de tratamiento antes del inicio del estudio (por grupo). Solución MIA (3 mg/50μL de solución salina al 0,9%) se inyectó directamente en el espacio intraarticular de la rodilla derecha bajo anestesia inducida con una mezcla de ketamina y xilazina. Las ratas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: (1) el grupo de solución salina sin inyección de MIA, (2) el grupo de MIA con inyección de MIA, (3) el grupo tratado con SDE (200 mg/kg) con inyección de MIA, y (4 ) el grupo tratado con indometacina (IM-) (2 mg/kg) con inyección de MIA. A las ratas se les administró SDE e IM por vía oral 1 semana antes de la inyección de MIA durante 4 semanas. La dosis de SDE e IM utilizada en este estudio se basó en las empleadas en estudios anteriores [10,13,14].

    2.4.3. Medidas de la distribución de carga de peso de las patas traseras

    Después de la inducción de la OA, se alteró el equilibrio original en la capacidad de carga de peso de las patas traseras. Se utilizó un probador de incapacitancia (Linton instrumentation, Norfolk, Reino Unido) para evaluar los cambios en la tolerancia al soporte de peso. Las ratas se colocaron cuidadosamente en la cámara de medición. La fuerza de carga ejercida por la extremidad trasera se promedió durante un período de 3 s. La relación de distribución del peso se calculó mediante la siguiente ecuación: [peso en la extremidad trasera derecha/(peso en la extremidad trasera derecha + peso en la extremidad trasera izquierda)] × 100 [15].

    2.4.4. Mediciones de los niveles de citocinas séricas

    Las muestras de sangre se centrifugaron a 1500 g durante 10 min a 4°C; luego el suero se recogió y se almacenó a -70°C hasta su uso. Los niveles de IL-1β, IL-6, TNF-αy la PGE2 en el suero se midieron utilizando kits ELISA de R&D Systems (Minneapolis, MN, EE. UU.) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

    2.4.5. Análisis RT-PCR cuantitativo en tiempo real

    El ARN total se extrajo del tejido de la articulación de la rodilla utilizando el reactivo TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.), se transcribió de forma inversa en ADNc y se amplificó por PCR utilizando un kit de PCR TM One Step RT con SYBR green (Applied Biosystems , Grand Island, Nueva York, EE. UU.). La PCR cuantitativa en tiempo real se realizó utilizando el sistema de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7500 (Applied Biosystems, Grand Island, NY, EE. UU.). Las secuencias del cebador y la secuencia de la sonda se muestran en la Tabla1. Se amplificaron alícuotas de ADNc de muestra y una cantidad igual de ADNc de GAPDH con la mezcla maestra de PCR TaqMan® Universal que contenía ADN polimerasa de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Applied Biosystems, Foster, CA, EE. UU.). Las condiciones de la PCR fueron 2 min a 50 °C, 10 min a 94 °C, 15 s a 95 °C y 1 min a 60 °C durante 40 ciclos. La concentración del gen diana se determinó utilizando el método comparativo Ct (número de ciclo umbral en el punto de cruce entre la gráfica de amplificación y el umbral), de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

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